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为了溶液中抗原抗体亲和力检测的亲和常数的真实性，全自动原位杂交仪必须严格要求实验条件以避免亲和值偏差低估十倍。首先，使用单价抗体片段（Fab 或 scFv），可以调整二价片段的数学计算，但前提是抗原每个分子包含单个结合位点。然而，随着抗体工程的出现，现在很容易在大肠杆菌中产生这样的片段。其次，为了准确测量游离抗体浓度，ELISA不应显著改变液相平衡。这需要进行初步实验以确定正确的实验条件。后，建议使用曲线拟合程序来避免方程线性化引入的偏差，例如Scatchard 变换。

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昆虫细胞表达重组蛋白涉及两代病毒的制备工作，简称为P1和P2代。P1代病毒主要是用于蛋白表达预实验以及扩增P2代病毒，P2代病毒用于大规模蛋白表达制备服务。昆虫细胞蛋白表达系统适合于膜蛋白的重组表达，4次及以下跨膜蛋白几乎可以有效地在昆虫细胞中进行表达和纯化。膜蛋白的纯化是一件比较耗时耗力的事情。但是昆虫蛋白表达系统的优势在于，利用病毒进行转染，操作相对容易，转染体系容易形成（相对哺乳动物瞬时转染体系）。

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荧光原位杂交仪中抗体纯化—Protein A/G亲和纯化：Protein A是一种分离自金黄色酿脓葡萄球菌的细胞壁蛋白，通过Fc区与哺乳动物的IgG结合。Protein A可用于分离和纯化IgG及其亚类与片段。Protein A 琼脂糖柱适合于免疫沉淀鼠IgG2a, IgG2b, IgA, human IgG1, IgG2IgG4。Protein G是一种分离自G 型链球菌的细胞壁蛋白，通过Fc区与哺乳动物的IgG结合。与Protein A Agrose相比对IgG具有更好的结合能力。Protein G Agarose适合于免疫沉淀鼠 IgG1，IgG2a, IgG2b, IgG3, rat IgG1, IgG2a, IgG2b, IgG2c, 兔子和羊多克隆抗体, 以及人 IgG1, IgG2, IgG3和IgG4。

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蛋白质的分离纯化是蛋白质组学研究的重要环节，佰泉生物拥有多年天然蛋白纯化分离的相关经验，可对组织液，唾液，肠液，动物或者人的血清，甚至是一些动物组织等进行分离纯化，我们的科学家会根据客户提供的天然蛋白大致分子量、缓冲液成分及背景资料做出具体的分析并做出可行性方案。仅GE纯化基质已有十多种，能同时大规模、扫描式的进行蛋白纯化和分离工作，节省客户宝贵的科研时间，以高质量满足客户需求。

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原位杂交仪中重组蛋白（Recombinant Protein），是指应用重组DNA或RNA技术，获得具有一定功能和活性的蛋白质。可通过体内和体外两种途径获得，两种方法均应用基因重组技术，获得连接有可以翻译成目的蛋白的基因片段的重组载体，然后将其转入可以表达目的蛋白的宿主细胞从而表达特定的重组蛋白分子。纯化的重组蛋白是信号转导分析、分析方法开发和药物研发的重要工具。

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通过各种方式获得目标抗体后，在某些情况下，为了方便对抗原进行观察和检测，通常会选择利用一些易测定又具有高度敏感性的物质作为标记物标记抗体，通过检测这些标记物的增强放大效应而产生的颜色变化、光谱变化等来显示或定量反应系统中抗原或抗体的性质与含量。利用抗体的组成物氨基酸的特殊理化性质，在特定的条件下使抗体与标记物结合，形成抗体标记物。抗体标记主要用于抗原的定位分析，能通过标记物的增强放大效应提高检测灵敏度，是一种快速价廉的定量测定方法。